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PCR检测试剂盒的具体使用步骤您都了解吗?
发布时间:2022-01-21   点击次数:38次
  PCR检测试剂盒的具体使用步骤您都了解吗?
  PCR检测试剂盒中含有聚合酶链式反应所需要各种试剂组分,如:引物、dNTPs、缓冲液、Taq酶等,PCR反应液混合液中加入检测样品,即可进行PCR扩增反应。PCR扩增产物经琼脂糖电泳染色判断,阳性样本将在相应大小的片段处出现特异性条带。
  PCR检测试剂盒的具体使用步骤:
  一、准备好试剂与仪器:
  磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
  二、实验步骤
  1.滴加0.0mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
  2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
  3.取出玻片,置玻片架上,先用0.0mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.0mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
  4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
  5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
  PCR检测试剂盒的特点:
  1准确可靠,临床双盲对照试验>000例,结果与金标准测序法比对,结果*性大于99%。
  2高灵敏:可检测低至0ng的人基因组DNA。
  3快速:整个检测流程只需3小时。
  4简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
  5防污染
  6高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
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